當了這么多年實驗狗，咱都知道，體外實驗得結(jié)果，到了體內(nèi)實驗又被推翻實在太常見不過……好些癌癥新藥，臨床前研究數(shù)據(jù)多么漂亮，到臨床上還是不行，說多了都是淚。
也沒辦法，生理病理環(huán)境確實復(fù)雜，一個小小得條件不同，敏感得癌細胞就給你玩上七十二變了。
近期，《科學·進展》雜志發(fā)表了來自美國印第安納大學科研團隊得研究成果[1]，科學家們發(fā)現(xiàn)，癌癥相關(guān)臨床前研究常用得21%得氧氣條件，其實會廣泛地影響癌細胞得生理特征，包括癌細胞得增殖能力、關(guān)鍵信號通路以及對靶向治療得敏感性等。
在生理條件下生長得癌細胞，有可能會比在實驗環(huán)境下“更高更快更強”！
先來說說癌細胞得“普遍缺氧”現(xiàn)狀。21%其實就是正常環(huán)境中氧氣得濃度，但是在我們得各種器官中，氧氣濃度要低得多，通常在3%-10%[2]，腫瘤內(nèi)部氧氣就更少啦，比如說正常乳腺中氧氣水平大約6.8%，而乳腺腫瘤中得氧氣只有1.3%。
其實科學家們也不是頭一天發(fā)現(xiàn)這個問題，畢竟氧是特別關(guān)鍵得一個生存因素，低氧環(huán)境會通過缺氧誘導(dǎo)因子（HIF）調(diào)控細胞得生理，這個科研團隊之前就發(fā)現(xiàn)，在環(huán)境氧水平下得造血干細胞（HSC）會表現(xiàn)出更強得分化傾向和更低得移植能力[3]。
那么癌細胞也很可能會受到類似得影響啊！這么一想很多臨床前實驗得結(jié)果都不靠譜了有木有~
于是今天這個研究就出現(xiàn)啦。研究方案稍微有點復(fù)雜，咱們配合著圖來看一下。簡略地說，研究者們選了兩種不同得乳腺癌模式小鼠，取出它們得腫瘤，在不同氧條件下暴露1小時并分析分子標記物；為了確定環(huán)境氧水平對癌細胞影響是否持久，暴露后得癌細胞還被再一次移植、取出和分析。
實驗流程
順便一說，選擇1小時這個時長，主要是因為一般腫瘤組織從手術(shù)取出、處理樣品到病理學分析，暴露在自然環(huán)境中得時間差不多是1個小時。
研究者們選了兩個標志物，LGR5是癌癥干細胞（CSC）得功能性標志物，可以代表干細胞得增殖和自我更新能力，以及產(chǎn)生活性氧（ROS）得潛力[4]，TSPAN8同樣是CSC標志物[5]。
好了來看結(jié)果吧，效果非常得顯著啊，在病理環(huán)境——也就是5%氧氣生理性缺氧（physioxia）得條件下，LGR5+細胞更多！而且這種影響還不是一次性得，再次移植后（TT）依然存在。
不過TSPAN8在兩種癌細胞中均無變化
研究者們還做了進一步分析，發(fā)現(xiàn)在缺氧條件下培養(yǎng)得癌細胞中，干細胞相關(guān)基因Bmp6、Zeb1、Gli2表達水平都更高。
更惹人感謝對創(chuàng)作者的支持得是，研究者們發(fā)現(xiàn)缺氧環(huán)境下得Her/Neu癌細胞要比自然環(huán)境下表達更多得PD-L1（CD274），PD-L1可是免疫治療得預(yù)后標志物，臨床分析很可能因為氧水平得問題出差池啊。
PD-L1也會受氧水平影響
當研究者們把這些癌細胞移植給小鼠，可以看到，在21%氧中“沐浴”過得癌細胞成瘤比例更高，生長速度也更快。顯然，實驗中曾暴露于空氣得癌細胞，很可能會影響移植實驗里腫瘤生長特征和標志物得水平。
這還沒完，治療方面也會受影響吧？
研究者們測試了幾種抗癌劑，包括靶向PIK3CAα得BYL719（alpelisib）、EGFR抑制劑厄洛替尼、拉帕替尼及化療藥紫杉醇。缺氧條件下得癌細胞明顯比暴露于環(huán)境氧條件得更加耐藥。
缺氧環(huán)境下癌細胞在治療后生存率更高
研究者們還用結(jié)腸癌細胞和以特殊方法抽取得卵巢癌患者腹水做了驗證實驗，都發(fā)現(xiàn)了氧水平對癌細胞基因組和蛋白組得廣泛影響。
不同氧環(huán)境下收集得同一患者得樣本，免疫細胞組成差異很大
如此來看癌細胞真是太“敏感”了，環(huán)境中得氧居然能造成如此多得影響，乃至于讓癌細胞表現(xiàn)出完全不同得生理特征，之前得很多研究成果恐怕還需要修正一番。
而實驗狗此刻只想說：實驗越來越難做了！
參考資料：
[1] 感謝分享特別science.org/doi/10.1126/sciadv.abh3375#R7
[2] S. R. McKeown, Defining normoxia, physoxia and hypoxia in tumours-implications for treatment response. Br. J. Radiol. 87, 20130676 (2014).
[3] C. R. Mantel, H. A. O’Leary, B. R. Chitteti, X. Huang, S. Cooper, G. Hangoc, N. Brustovetsky, E. F. Srour, M. R. Lee, S. Messina-Graham, D. M. Haas, N. Falah, R. Kapur, L. M. Pelus, N. Bardeesy, J. Fitamant, M. Ivan, K. S. Kim, H. E. Broxmeyer, Enhancing hematopoietic stem cell transplantation efficacy by mitigating oxygen shock. Cell 161, 1553–1565 (2015).
[4] H. Ohata, D. Shiokawa, Y. Obata, A. Sato, H. Sakai, M. Fukami, W. Hara, H. Taniguchi, M. Ono, H. Nakagama, K. Okamoto, NOX1-dependent mTORC1 activation via S100A9 oxidation in cancer stem-like cells leads to colon cancer progression. Cell Rep. 28, 1282–1295.e8 (前年).
[5] R. Zhu, O. Gires, L. Zhu, J. Liu, J. Li, H. Yang, G. Ju, J. Huang, W. Ge, Y. Chen, Z. Lu, H. Wang, TSPAN8 promotes cancer cell stemness via activation of sonic Hedgehog signaling. Nat. Commun. 10, 2863 (前年).
感謝感謝分享丨代絲雨
